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综合新闻
欢迎临床研究生来交大二院血液科实验室从事课题研究
欢迎临床研究生来交大二院血液科实验室从事课题研究
发布时间：2010-03-02 11:51:55 浏览次数：
欢迎临床研究生来交大二院血液科实验室从事课题研究
西安交通大学第二医院血液科拥有全院唯一的美国B-D公司生产FACS Callibur流式细胞仪,可用于细胞的免疫分型、检测细胞表面抗原、分析细胞周期与凋亡、细胞膜电位改变以及细胞内钙离子浓度等;拥有全套细胞培养设备,包括CO2孵箱、超净工作台、低速离心机、倒置显微镜和荧光显微镜,能够进行原代及肿瘤细胞株的培养,研究药物对培养细胞的作用以及免疫荧光分析;拥有-86℃超低温冰箱;拥有ELISA酶联免疫检测仪;新购上海安亭高速低温离心机,可进行DNA、RNA及蛋白质的分离纯化.
人员方面,实验室有经验丰富的技术人员负责流式细胞仪的操作;具有熟悉细胞培养并能悉心指导的专业人员;有全院唯一在美国哥伦比亚大学医学院经过3年正规博士后训练的科研人员进行课题指导及实验技术支持.
为了促进学科之间的科研交流,增强科室内的学术气氛,同时提高现有科研设备的使用效率,诚挚邀请临床研究生或热心于科研的人员来交大二院血液科实验室从事课题研究,我们会提供最大限度的支持与帮助.
联系人:王剑利 87679457
田 玮 87679268
西安交通大学第二医院血液科
流式细胞术在生物医学中的应用
流式细胞仪(flow cytometer,FCM) 能快速、精确地测量通过检测区液流中的各种粒子.这些粒子可以是细胞、大分子、乳胶滴或其他粒子.流式细胞术是对单细胞定量分析和分选的新技术.通常是应用一个激光和有关的光学检测系统来收集这些信号以供分析.其检测速度之快,统计学精度之高,是其他方法无法比拟的.它可以研究一个细胞从新生到死亡,从细胞膜到胞浆和核内物质及染色体,还可以探讨不同物质之间的关系.同时它还可以从一个细胞中测得多种参数(如DNA、RNA、蛋白质和细胞体积等),进行多信息分析,为细胞生物学和生物医学研究提供强而有力的手段.从上世纪80年代以来,FCM已广泛地应用于基础和临床医学研究,并使之成为切实可行的有效研究方法.它在免疫学、肿瘤学、细胞遗传学、病理学、放射生物学等学科中已形成了独立的学科分支.FCM主要可定量分析细胞表面和细胞内抗原,以及对细胞分子水平的核酸含量的测量,这些参数的定量变化已被用于确定正常和异常细胞的分化和生长,预示各种病理状态下细胞的生物行为.
FCM是集现代电子物理技术、激光技术、电子计算机技术于一身的先进科学仪器,开创了荧光技术的又一个崭新的领域.近年来此项技术发展十分迅速,不断有更新换代产品出现,具有更高灵敏度、高分辨率、双激光、多参数分析的仪器不断问世,并在朝着经济实用、操作简便、小巧精致、自动化程度高的方向发展.
流式细胞术可以用于细胞的免疫分型、细胞表面抗原以及胞内蛋白的检测、分析细胞表面受体、细胞周期与凋亡、细胞膜电位和细胞内钙离子等等.西安交通大学第二医院血液科拥有美国B-D公司生产的FCM FACSCallibur,它是最早获得美国FDA批准可用于临床诊断的流式细胞仪,性能卓越,结果可靠,现已用于对临床及科研标本细胞的免疫分型和细胞周期的分析,达到国内、外领先水平.
实时定量RT-PCR检测慢性粒细胞白血病融合基因
慢性粒细胞白血病简称慢粒(CML),是临床上一种起病及发展相对缓慢的白血病,年发病率约1.5/10万,以中年人居多.它是一种起源于骨髓多种造血干细胞的恶性增殖性疾病.其发病原因迄今尚未完全明了.临床以脾大和外周血粒细胞异常、增多为主要特征;目前用常规化疗尚难治愈,中位生存期平均为42个月,大多以急粒变、急淋变或急单变而告终.
Ph染色体t (9;22)是慢粒白血病克隆性的细胞遗传学标记;由于其长臂互易在断裂区产生bcr/abl融合基因,现获知其产物是一种异常的酪氨酸激酶蛋白,致使骨髓细胞增殖紊乱.约95%的慢粒白血病和20%的急性淋巴细胞白血病患者的骨髓细胞和血细胞中会有bcr/abl融合基因的出现.因此检测bcr/abl融合基因已成为临床诊断慢粒白血病以及治疗后追踪残余白血病细胞的主要依据.目前临床上常采用的逆转录PCR(RT-PCR)方法只能对bcr/abl融合基因进行定性分析,不能做精细的定量检测,因此无法对治疗后残余的白血病细胞进行追踪、观察,从而延误对患者的正确治疗.
实时定量(Real-time quantitative) RT-PCR是新近发展的一项定量PCR 技术,它的特点是建立实时扩增曲线,根据标准品的CT(Cycle at threshold,指PCR 扩增过程中,荧光信号开始由本底进入指数增长阶段的拐点所对应的循环次数)值建立标准曲线,进而对未知样品定量,由于CT值与起始cDNA 量有良好的相关性,因此可以实现真正意义的定量.与传统RT-PCR比较,实时定量RT-PCR具有高灵敏度、高特异性、快速简便和结果可靠的优点,能同时对慢粒白血病进行快速定性和定量检测.西安交通大学第二医院血液科在陕西省内率先应用实时定量RT-PCR技术检测慢性粒细胞白血病患者体内的bcr/abl融合基因,用于临床对慢粒白血病的早期诊断、疗效观察和预后评估,达到国内、外领先水平.
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